HPLC 이동상 관리 총정리!

HPLC 이동상 관리 총정리! 제약회사 분석 실무에서 품질을 지키는 핵심 포인트

HPLC 분석은 제약회사의 품질관리에서 빠질 수 없는 핵심 기술입니다.
하지만 정확한 결과를 얻기 위해서는 장비 세팅뿐만 아니라
이동상(Mobile Phase) 관리 역시 매우 중요합니다.

이동상 품질이 분석 신뢰성을 좌우할 수 있기 때문에,
올바른 준비, 관리, 저장 방법을 체계적으로 이해하고 실천하는 것이 필요합니다.

HPLC이동상관리

 

HPLC 이동상이란 무엇인가?

HPLC 이동상(Mobile Phase) 은
컬럼 내부를 흐르면서 시료를 운반하고,
시료 성분들을 분리하는 데 필요한 액체를 말합니다.
이동상은 일반적으로
유기용매(메탄올, 아세토니트릴 등)
물 또는 완충용액(버퍼)
을 혼합하여 사용합니다.
이동상의 조성과 품질은
피크 분리도
머무는 시간(Retention Time)
기초선 안정성
에 직접적인 영향을 미칩니다.

이동상 관리가 왜 중요한가?

이동상 관리는 단순한 준비 작업이 아니라
분석 결과의 정확성, 재현성, 장비 수명까지 좌우하는 핵심 요소입니다.
이동상 관리가 부실하면 발생할 수 있는 문제들:
기초선 흔들림(Baseline Drift)
머무는 시간 변동(Retention Time Shift)
피크 분리 불량
컬럼 수명 단축
펌프 고장(용매 입자, 오염)
이동상 품질 = 분석 신뢰성
이라고 할 만큼, 이동상 관리의 중요성은 아무리 강조해도 지나치지 않습니다.

이동상 준비 방법

1. 용매 선택
분석 목적과 컬럼 종류에 따라 적절한 용매를 선택합니다.
일반적으로 HPLC 등급(High Purity Grade) 이상의 고순도 용매를 사용합니다.
2. 이동상 혼합
정확한 비율로 물과 유기용매를 혼합합니다.
버퍼를 사용하는 경우, pH 조정 후 최종 희석합니다.
3. 여과(Filtration)
0.45 μm 또는 0.22 μm 여과지를 사용하여 이동상을 필터링합니다.
입자, 미생물, 불순물 제거가 목적입니다.
4. 기포 제거(Degassing)
초음파(sonication) 처리 또는 헬륨 퍼징(Helium Sparging)을 통해 용존 가스를 제거합니다.
기포는 펌프 오류, 기초선 불안정의 주요 원인이 됩니다.

이동상 저장 및 사용 관리

1. 보관 용기
갈색 병(Brown Bottle) 또는 PTFE 코팅된 용기 사용을 권장합니다.
빛, 공기, 수분 침투를 최소화해야 합니다.
2. 보관 온도
이동상은 일반적으로 실온(20~25℃)에서 보관합니다.
장기간 보관이 필요한 경우 냉장 보관을 고려할 수 있지만, 사용 전에는 반드시 실온 복귀가 필요합니다.
3. 사용 기한 관리
이동상은 제조 후 일반적으로 7일 이내 사용을 권장합니다.
버퍼가 포함된 이동상은 제조 후 2~3일 이내 사용하는 것이 이상적입니다.
4. 라벨링
제조일자, 조성, 담당자 이름을 명확히 기록하여 부착합니다.

이동상 관련 주의사항

버퍼 사용 시 변질 주의
pH가 변하면 분석 결과에 큰 영향을 줄 수 있으므로, 사용 전 pH를 재확인하는 것이 좋습니다.
혼합 용매의 상분리 주의
혼합 비율이 극단적인 경우(예: 물:아세토니트릴 90:10) 용매 간 상분리 현상이 발생할 수 있어, 사용 직전에 충분히 혼합해야 합니다.
용매 오염 방지
주사기, 파이펫 등 모든 기구는 철저히 세척하여 사용합니다.
기포 유입 방지
이동상 병은 항상 펌프 흡입 튜브보다 높은 위치에 두고, 튜브 끝이 용매에 잠겨 있도록 유지합니다.

이동상 관리 실수 시 문제 사례

1. 기포로 인한 펌프 압력 불안정
용존 가스를 제거하지 않고 이동상을 사용하면, 분석 중 펌프 압력이 출렁이는 현상이 발생합니다.
2. 기초선 노이즈 증가
이동상 내 불순물이나 미생물 번식으로 인해 기초선이 흔들리고, 분석 민감도가 떨어질 수 있습니다.
3. 머무는 시간 변동
버퍼 pH 관리 실패, 이동상 조성 오류로 인해 머무는 시간이 일정하지 않게 변합니다.
4. 컬럼 오염 및 수명 단축
여과하지 않은 이동상을 사용하거나, 버퍼 결정물이 발생하면 컬럼 내부에 손상을 줄 수 있습니다.

마무리

HPLC 분석의 정확성과 신뢰성은
이동상 준비, 보관, 사용 관리에 달려 있습니다.
특히 제약회사 품질관리 부서에서는
이동상 관리 절차를 SOP(Standard Operating Procedure)로 명문화하고,
모든 준비 과정과 보관 상태를 문서화하여 관리합니다.